HIV検査：行動を起こす5つの方法

エイズに関しては、多くの人が感染するのではないかと恐れ、恐怖を感じます。事実により、エイズは広く伝染し、特に性行為によって伝染することが証明されているため、体調不良を感じたら、すぐに検査を受ける必要があります。現在、最も一般的なエイズ検査方法には、抗体検査、抗原検査、酵素結合免疫吸着法、免疫ブロット法、免疫蛍光法（IFA）などがあります。

1. 抗体と抗原の検出

HIV 抗体は、通常、ヒト感染後数週間で徐々に現れ、生涯にわたって持続します。血清学的検査は、スクリーニング検査と確認検査に分けられます。最も一般的に使用されるスクリーニング検査と確認検査は、それぞれ ELISA とウェスタンブロット (WB) です。従来の実験方法: 酵素結合免疫吸着法、ウエスタンブロット法、間接免疫蛍光法 (IFA)。迅速検出法: ゼラチン粒子凝集試験、ドット免疫結合試験、P24抗原検出、分子生物学的方法、RT?PCR検出法、蛍光リアルタイムPCR検出技術、分岐DNA (bDNA)、リガーゼ連鎖反応 (LCR)、核酸配列依存性増幅 (NASBA)、転写媒介増幅 (TMA)

2. 酵素免疫測定法

ELISA の基本原理は、免疫反応物が化学的または免疫学的方法によって酵素複合体を形成することです。酵素複合体は、検査対象のサンプル内の対応する抗原または抗体と結合して免疫複合体を形成します。次に、酵素基質を加えます。酵素の触媒作用または加水分解後、無色の基質が色を生成し、その結果を肉眼または分光光度計で観察します。初期スクリーニングに使用される HIV ELISA 試薬は、現在、第 4 世代の検出試薬に進化しています。第一世代の試薬では、主にウイルス溶解物または部分的に精製されたウイルス抗原を使用して反応プレートをコーティングし、血清中の抗体を検出していました。コーティングされた抗原は純度があまり高くないため、偽陽性率が高くなります。第2世代試薬は、遺伝子工学的手法で得られた組み換え抗原と合成ペプチドを使用して反応プレートをコーティングします。精製抗原の使用により、特異性が大幅に向上しました。第3世代試薬は二重抗原サンドイッチ法を用いて抗体を検出し、感度がさらに向上しました。第4世代試薬は、第3世代試薬をベースにさらにP24抗原の検出機能を追加し、HIV抗原と抗P24抗体が同時に反応プレートに塗布され、血清中のHIV抗体とP24抗原を同時に検出することができます。

3. 免疫ブロット法

免疫ブロッティング試験は主に確認試験に使用されます。基本的な原理は、HIVウイルス抗原全体をSDS-PAGE電気泳動にかけて異なる分子量のタンパク質バンドを分離し、次にこれらの分離された異なるタンパク質バンドをニトロセルロース膜に転写することです。膜は細片に切断され、ニトロセルロース膜の各細片には電気泳動によって分離された HIV ウイルス抗原が含まれています。検査する血清サンプルを希釈液で 1/100 に希釈し、ニトロセルロース膜に直接加え、一定温度で振とうして完全に接触させて反応させます。血清に抗 HIV 抗体が含まれている場合、膜ストリップ上の抗原バンドと結合します。抗ヒトIgG酵素複合体と基質を添加すると、反応性抗原-抗体結合バンドが紫褐色に現れ、バンドの出現に基づいて結果を判定できます。免疫ブロット検査の特異度はそれほど高くなく、偽陽性率は約 2% であると報告されていますが、免疫ブロット検査は依然として最も一般的に使用されている HIV 確認検査です。

4. 免疫蛍光アッセイ（IFA）

基本的な原理は、H?9またはHUT?78培養細胞をキャリアとして使用し、細胞にHIVを感染させると、細胞にHIV抗原が含まれるようになります。HIVに感染したリンパ球をスライドガラスに塗りつけ、固定し、抗原切片として準備します。検査対象の血清を加え、検査対象の血清中の抗HIV抗体を抗原と結合させ、次にフルオレセイン標識抗ヒトIgと結合させます。蛍光顕微鏡下では、細胞に黄緑色の蛍光が見られます。

5. ゼラチン粒子凝集試験（PA）

PA の基本的なプロセスは、まずサンプルを希釈し、次に抗原感作ゼラチン粒子と非感作ゼラチン粒子をそれぞれ追加し、よく混ぜて保温（通常は室温）することです。血清中にHIV抗体が存在する場合、抗原感作ゼラチン粒子が抗体と反応し、ウェル内のゼラチン粒子の凝集に基づいて結果を判定します。 PA は操作が簡単で、特別な器具や装置を必要とせず、少量の検体の検査に適しています。